利用(yong)計算機進行(xing)圖(tu)象處理，從而得到細(xi)胞或組織(zhi)內(nei)部微細(xi)結構的熒光圖(tu)象，以(yi)及(ji)(ji)在(zai)亞細(xi)胞水(shui)平上觀(guan)察(cha)諸如Ca2+、pH值、膜電(dian)位等生理信號及(ji)(ji)細(xi)胞形態的變化。
下面讓我們來了解一下激光共聚焦顯微鏡的(de)組成結(jie)構吧
激(ji)光(guang)共聚焦(jiao)掃(sao)描(miao)顯微鏡(jing)(Confocal laser scanning microscope，CLSM)用激(ji)光(guang)作掃(sao)描(miao)光(guang)源(yuan)，逐點(dian)(dian)、逐行、逐面快(kuai)速掃(sao)描(miao)成像，掃(sao)描(miao)的(de)激(ji)光(guang)與(yu)熒光(guang)收(shou)集共用一(yi)個物鏡(jing)，物鏡(jing)的(de)焦(jiao)點(dian)(dian)即掃(sao)描(miao)激(ji)光(guang)的(de)聚焦(jiao)點(dian)(dian)，也是瞬時(shi)成像的(de)物點(dian)(dian)。
系統經一(yi)(yi)次(ci)調(diao)焦(jiao)，掃(sao)描限制在(zai)樣(yang)品(pin)(pin)的一(yi)(yi)個(ge)平(ping)面內。調(diao)焦(jiao)深度不(bu)一(yi)(yi)樣(yang)時，就(jiu)可以(yi)獲(huo)得樣(yang)品(pin)(pin)不(bu)同(tong)深度層次(ci)的圖(tu)像，這(zhe)些圖(tu)像信息都儲于計(ji)算機內，通(tong)過計(ji)算機分析和模擬(ni)，就(jiu)能顯示(shi)細胞樣(yang)品(pin)(pin)的立體(ti)結構。
在(zai)結構 配置上，激光(guang)(guang)(guang)掃描(miao)共(gong)聚焦顯(xian)微鏡除了包(bao)括(kuo)普通光(guang)(guang)(guang)學顯(xian)微鏡的基(ji)本構造(zao)外，還包(bao)括(kuo)激光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)源(yuan)、掃描(miao)裝(zhuang)置、檢測(ce)器、計(ji)算(suan)機系(xi)統 (包(bao)括(kuo)數(shu)據(ju)采集、處理(li)、轉換、應(ying)用軟件)、圖像輸出設備、光(guang)(guang)(guang)學裝(zhuang)置和共(gong)聚焦系(xi)統等部分。
由于該儀(yi)器具有高分辨率(lv)、高靈敏度、"光(guang)學切片"(Optical sectioning)、三維重(zhong)建、動態分析等優點，因而為基礎醫學與臨床醫學的(de)研究提供(gong)了有效手段。此外，CLSM 對(dui)熒光(guang)樣品(pin)(pin)的(de)觀察(cha)具有明顯的(de)優勢，只要能(neng)用熒光(guang)探針進行標記的(de)樣品(pin)(pin)就可用其觀察(cha)。
激光(guang)共(gong)聚(ju)焦(jiao)掃描(miao)顯微鏡既可(ke)以用于觀(guan)察細胞形態(tai)，也可(ke)以用于細胞內生化成(cheng)分(fen)的定量分(fen)析、光(guang)密度統計以及細胞形態(tai)的測量, 配合焦(jiao)點穩定系(xi)統可(ke)以實現長時間(jian)活細胞動態(tai)觀(guan)察。
